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標題:脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性檢測試劑盒
產品概述
脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性檢測試劑盒
測定原理:
DHAR催化GSH還原DHA生成AsA,通過測定DHA減少速率,計算DHAR活性。
實驗中所需儀器及設備:
研缽、冰、低溫離心機、紫外分光光度計/、微量石英比色皿/96孔板、可調式移液器和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體50 mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體35 mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1瓶(棕色),4℃保存。臨用前加入2.5 mL蒸餾水充分溶解。
試劑四:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加入2.5 mL蒸餾水充分溶解。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣品,加試劑一1 mL,冰上充分研磨,16000g 4℃離心20min,取上清液待測。
DHAR測定操作:
1. 分光光度計預熱30 min,調節(jié)波長到265nm,蒸餾水調零。
2. 試劑二在25℃水浴鍋中預熱30 min以上。
3. 空白管:在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL蒸餾水、20μL試劑三、20μL試劑四和140μL 試劑二,迅速混勻后于265nm比色,記錄30s和150s的吸光值。
4. 測定管:在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL上清液、20μL試劑三、20μL試劑四和140μL 試劑二,迅速混勻后于265nm比色,記錄30s和150s的吸光值。
脫氫抗壞血酸還原酶(DHAR)活性檢測試劑盒
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